Usługa badawcza polegająca na wykonaniu panelu badań ADMET dla dziesięciu niskocząsteczkowych związków chemicznych w ramach projektu Modulacja allosteryczna - nowa strategia w farmakoterapii. Identyfikacja własności psychotropowych ligandów receptorów glutaminianergicznych III grupy (ModAll) współfinansowanego przez Unię Europejską ze środków Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego w ramach Programu Operacyjnego Innowacyjna Gospodarka, 2007-2013.

Opis przedmiotu przetargu: Przedmiotem zamówienia jest wykonanie usługi badawczej polegającej na wykonaniu panelu badań ADMET dla dziesięciu niskocząsteczkowych związków chemicznych. Badania powinny zostać wykonane w następujących etapach: I etap 1. Testy fizykochemiczne a) Analiza rozpuszczalności - badania powinny zostać wykonane dla co najmniej czterech wartościach pH, w co najmniej trzech powtórzeniach dla każdej wartości pH. b) Analiza lipofilności - wyznaczenie współczynnika logD oraz współczynnika logP. c) Wyznaczenie wartości pKa. 2. Przenikanie przez bariery biologiczne a) Test PAMPA - badanie powinno zostać wykonane przy wykorzystaniu płytek MultiScreen-IP PAMPA filter plate. b) Wpływ na glikoproteinę P (P-gp) - badanie powinno zostać wykonane przy użyciu komórek Caco-2, wyznaczenie wartości IC50 (zakres stężeń związków 1-100 µM, co najmniej trzy powtórzenia). II etap 1. Badania metabolizmu a) Stabilność metaboliczna - badania powinny zostać wykonane przy wykorzystaniu ludzkiej frakcji S9, w co najmniej czterech punktach czasowych. b) Identyfikacja metabolitów - badania powinny zostać wykonane przy wykorzystaniu ludzkiej frakcji S9 oraz przy zastosowanie technik LC/MS/MS. c) Określenie okresu półtrwania - badania in vivo przy wykorzystaniu myszy, podanie związków drogą per os, pomiary powinny zostać wykonane w co najmniej ośmiu punktach czasowych, co najmniej trzy zwierzęta na każdy punkt czasowy. Badania powinny obejmować także przygotowanie metody bioanalitycznej z wykorzystaniem standardu wewnętrznego. d) Stabilność w osoczu - badania powinny zostać wykonane w osoczu ludzkim, pomiary powinny zostać wykonane w co najmniej pięciu punktach czasowych. III etap 1. Analiza genotoksyczności a) Przesiewowa wersja testu AMESa - badania powinny zostać wykonane na dwóch szczepach Salomonella typhimurium tj. TA98/TA100, w obecności i przy braku systemu aktywacji metabolicznej S9, w co najmniej sześciu stężeniach i trzech powtórzeniach. IV etap 1. Analiza cytotoksyczności a) Wykonanie testu MTS zgodnie z wytycznymi zawartymi w normie PN-EN ISO 10993-5:2009: Badania cytotoksyczności in vitro. Badania powinny zostać przeprowadzone dla każdego związku w co najmniej ośmiu stężeniach i co najmniej trzech powtórzeniach dla każdego stężenia, w pojedynczym czasie inkubacji na białaczkowej linii komórkowej pochodzenia mielocytarnego HL-60. 2. Analiza śmierci apoptotycznej komórek a) Badania powinny zostać wykonane za pomocą cytometrii przepływowej (AnxV/PI) przy wykorzystaniu linii komórkowej neuroblastoma SH-SY5Y, w co najmniej dwóch stężeniach, każde stężenie w co najmniej dwóch niezależnych powtórzeniach. V etap 1. Analiza proliferacji a) Wykonanie testu BrdU przy wykorzystaniu białaczkowej linii komórkowej pochodzenia mielocytarnego HL-60. Badanie powinno zawierać także pełną optymalizację warunków testu dla co najmniej dwóch wybranych związków (wybór ilości komórek wysiewanych na dołek, optymalizację czasu inkubacji, wybór zakresu stężeń oraz walidację metody). Analiza aktywności mitogennej dziesięciu związków powinna zostać wykonana przy użyciu zoptymalizowanego oraz zwalidowanego modelu. VI etap 1. Badania blokady kanału potasowego hERG a) Badanie powinno zostać wykonane metodą Patch Clamp przy wykorzystaniu komórek CHO-K1, przy co najmniej trzech stężeniach badanych związków.