KOMPLEKSOWA USŁUGA BADAWCZA PRZEPROWADZENIA DOŚWIADCZEŃ NA ZWIERZETACH - MYSZACH

Opis przedmiotu przetargu: 1. W zakres przedmiotu zamówienia wchodzi: 1) Zakup zwierząt doświadczalnych, którymi będą myszy z upośledzonym układem immunologicznym nu/nu, tej samej płci, w podobnym wieku w ilości 88 sztuk, 2) Zakup odpowiedniej ilości matrigelu, strzykawek, igieł, roztworów do iniekcji oraz wszystkich niezbędnych odczynników i materiałów zużywalnych, potrzebnych do przeprowadzenia doświadczeń na zwierzętach, 3) Utrzymanie zwierząt w dobrostanie, zgodnie z Rozporządzeniem Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dnia 10 marca 2006 r. w sprawie szczegółowych warunków utrzymania zwierząt laboratoryjnych w jednostkach doświadczalnych, jednostkach hodowlanych i u dostawców a w szczególności zapewnienie odpowiedniej karmy, warunków lokalowych i higienicznych oraz codzienną opiekę (odpowiednio wyposażona zwierzętarnia umożliwiająca utrzymanie zwierząt w standardzie SPF). 4) Uzyskanie zgody właściwej Komisji Etycznej ds. Doświadczeń na Zwierzętach przeprowadzenia doświadczeń, zaplanowanych w ramach udzielonego zlecenia oraz dostarczenie uchwały/zgody Komisji ds. doświadczeń na zwierzętach w terminie nie dłuższym niż 4 miesiące od daty podpisania umowy, 5) Przeprowadzenie badań eksperymentalnych wg opisu, 6) Utylizacja zwierząt oraz odpadów powstałych w trakcie realizacji doświadczenia, 7) Przygotowanie raportu końcowego z przeprowadzonych badań w terminie dwóch tygodni od ich zakończenia oraz raportów po zakończeniu poszczególnych etapów. 2. Badania eksperymentalne będą przeprowadzone w dwóch etapach: 1) Etap I - przeprowadzony z udziałem 48 osobników myszy nu/nu, tej samej płci podzielonych na sześć równoważnych grup. Każdej z myszy podskórnie ma być podawany roztwór matrigelu z wariantami komórkowymi linii COS7. Zamawiający dostarczy Wykonawcy w dniu podań odpowiednią ilość komórek do pierwszego etapu badań oraz wyizolowane i oczyszczone plazmidy do drugiego etapu badań. Ilość matrigelu i komórek podawanych podskórnie myszom oraz czas rozpoczęcia doświadczeń zostaną ustalone z badaczami zadania 11 Zamawiającego, przynajmniej 3 tygodnie wcześniej. Eksperyment ma zostać przeprowadzony w czasie identycznym dla wszystkich grup myszy (nie dłuższym niż 10 dni i nie krótszym niż 3 dni). Po zakończeniu doświadczenia Wykonawca zobowiązany jest do pobrania próbek matrigelu z tkanki podskórnej, odpowiedniego zabezpieczeniu materiału w 10% roztworze neutralizowanej formaliny i przekazania w ciągu 24 godzin od pobrania do Zakładu Technik Molekularnych AM we Wrocławiu, ul. Skłodowskiej-Curie 52, 50-369 Wrocław (ZTM). Po zakończeniu etapu Wykonawca zobowiązany jest do odpowiedniego pobrania, zabezpieczenia i przekazania do ZTM: a) próbek krwi zwierząt do 24 godzin od pobrania, b) szpiku kostnego do 6 godzin od pobrania, w celu izolacji surowicy i komórek macierzystych. 2) Etap II - przeprowadzony na 40 myszach bezgrasiczych, podzielonych na pięć równolicznych grup. W początkowym etapie doświadczenia wszystkie myszy mają zostać poddane chirurgicznemu zamknięciu tętnicy udowej w celu wywołania niedokrwienia kończyny. W czasie ustalonym z badaczami zadania 11 Zamawiającego, w obrębie niedokrwionej kończyny, mają być podawane domięśniowo w postaci iniekcji roztwory plazmidów ekspresyjnych lub mieszaniny plazmidów i komórek macierzystych, przygotowanych przez zespół badawczy zadania 11 Zamawiającego. Dokładna procedura doświadczalna zostanie przekazana Wykonawcy dwa tygodnie przed rozpoczęciem badań. W przypadku rezygnacji, z którejś z grup doświadczalnych, zwierzęta mają zostać rozdzielone równomiernie do pozostałych grup. Po zakończeniu doświadczenia Wykonawca zobowiązany jest do pobrania próbek tkanek z kończyn poddanych terapii genowej i/lub komórkowej i jego odpowiedniego zabezpieczeniu zarówno do roztworu RNA later jak i 10% roztworu neutralizowanej formaliny i przekazania w ciągu 24 godzin od pobrania do ZTM. Po zakończeniu etapu Wykonawca zobowiązany jest do odpowiedniego pobrania, zabezpieczenia i przekazania do ZTM próbek krwi pobranych od zwierząt doświadczalnych.